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脱氧核糖核酸酶I（Deoxyribonuclease I，简称DNase I）是一种能够水解DNA磷酸二酯键的核酸内切酶。它可作用于单链DNA（ssDNA）和双链DNA（dsDNA），生成以5′-磷酸为末端、3′-羟基为末端的寡核苷酸片段。