IdeS

IdeS Protease，全称为免疫球蛋白G降解酶（Immunoglubulin G-degrading enzyme of Streptococcus pyogenes），是由人类致病菌酿脓链球菌分泌到胞外的一种半胱氨酸水解酶。IdeS酶能够特异地酶切免疫球蛋白G（IgG），且能够在广泛的pH和温度范围内保持活性，在各种实验条件下都能够发挥良好的催化效果。此外，IdeS酶只针对IgG进行酶切，这种高度的特异性使得IdeS酶成为研究IgG结构和功能的不二之选。IdeS酶的催化效率极高，能够在短时间内将IgG分解为片段，从而方便进行后续的分析和研究。

IdeS应用

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研究IgG的结构和功能。通过酶切IgG，解析其结构，可以更深入地了解其在免疫应答中的作用，为开发新的药物和治疗方法提供理论支持。

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为治疗自身免疫性疾病提供新的思路和方法。通过IdeS酶切IgG，进而达到治疗的目的。如IdeS 能有效清除HLA的抗体，为致敏受者成功进行肾移植开辟了治疗道路。

图1. IdeS用于HLA抗体的脱敏治疗

现优爱推出高纯度和高活性IdeS和IdeZ酶，两者都可以在铰链区下方酶切人IgG1-4，猴、鼠、兔、羊的IgG，但IdeZ酶对小鼠IgG的酶切活性更好。

IdeS酶

图2. IdeS酶活性验证

（M: marker; 1: rabbit IgG; 2: 5μg rabbit IgG add 5 units IdeS; 3: 5μg rabbit IgG add 6.25 units IdeS; 4: 5μg rabbit IgG add 8.3 units IdeS; 5: 5μg rabbit IgG add 12.5 units IdeS; 6: 5μg rabbit IgG add 25 units IdeS）

IdeZ酶

图3. IdeZ酶活性验证

（M: marker; 1: rabbit IgG; 2: 5μg rabbit IgG add 5 units IdeZ; 3: 5μg rabbit IgG add 10 units IdeZ; 4: 5μg rabbit IgG add 33 units IdeZ; 5: 5μg rabbit IgG add 50 units IdeZ)

PNGase F

N-糖基化是最普遍的翻译后蛋白修饰之一，在许多生物学过程中起着重要作用，如细胞-细胞相互作用、蛋白质折叠和免疫反应。在常见的n -糖蛋白组研究中，先进的富集技术，加上多维色谱分离和高分辨率质谱(MS)，极大地提高了n -糖基化位点定位的动态范围和检测限。然而，在当前的技术条件下，大规模分析复杂样品中的完整n -糖肽仍然是一个挑战。因此，在一般的基于质谱的方法中，在质谱分析之前，需要去除附着的聚糖，因为在CID碰撞诱导解离原理（Collision Induced Dissociation, CID）过程中，聚糖部分很容易破碎，而肽部分基本完好无损，从而阻碍了鉴定。

目前用于切割N链聚糖的酶有肽-N-糖苷酶F (PNGase F)、内切糖苷酶Endo F和Endo H。其中PNGase F因其底物特异性和高活性而成为广泛应用的糖苷酶。PNGase F可以从Elizabeth-kingia miricola克隆，并在大肠杆菌中过表达获得。它属于重组糖苷酶，能够裂解由天冬酰胺连接的高甘露糖、杂合和复杂的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位点为糖蛋白内侧N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）和天冬酰氨残基之间的酰胺键。

图4. PNGase F去除N糖

PNGase F应用

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用于研究糖蛋白的生物化学性质和结构。由于PNGase F能够特异性地切割N-连接糖，这对于分析糖蛋白的糖型结构和序列具有重要意义。

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用于研究糖蛋白的生物功能和作用机制。例如，通过切割糖蛋白上的N-连接糖，可以影响蛋白质的构象、稳定性、溶解性等性质，从而影响其生物学活性。也可以影响细胞信号转导的通路和细胞表面受体的识别，从而影响细胞的生长、分化、迁移等生物学过程。

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用于开发药物。例如，通过切割肿瘤细胞表面的糖蛋白，可以破坏肿瘤细胞的糖基化修饰，从而影响其生物学行为，为肿瘤治疗提供新的思路。

现优爱推出高纯度和高活性PNGase F酶，助力生物药物研发及生产。

PNgase F

图5.PNGase F酶活性验证

(M: marker; 1: Rnase B 10μg; 2: Rnase B 10μg+0.25U PNGF 3: Rnase B 10μg+0.5U PNGF; 4: Rnase B 10μg+1U PNGF)

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