pH-sensitive lgG labeling reagents (Red)

1.UA070127 与抗体孵育
 1.1 使用去离子水，将冻干粉形式的UA070127根据溶解方法进行复溶。
 1.2 用细胞培养基制备足够体积的 4X待测抗体工作溶液（受试浓度的四倍，受试浓度根据前期流式条件摸索）。例如：2μg/ml可能是抗体的良好起始测试浓度，因此 4X工作溶液为 8μg/ml。
 1.3 用细胞培养基制备足够体积的4X UA070127 工作溶液。待测抗体与UA070127 摩尔比 1:2。
 1.4 将4X待测抗体工作溶液和4X UA070127 工作溶液按 1:1 的体积比混合。室温避光孵育 1h，得到 Ab- UA070127  复合物2X工作液。
2. Ab- UA070127 复合物与细胞孵育
 2.1细胞处理：收集、洗涤细胞，使用完全培养基调整细胞浓度，悬浮细胞 1-2×10^5 cells/mL 的浓度，贴壁细胞 0.5-1×10^5cells/mL 的浓度，96 孔板每孔加入 100μL 细胞悬液。
 2.2 孵育：每孔加入 100μL Ab- UA070127  复合物 2X 工作液，37℃ 5% CO2 培养箱中培养。
3. 流式检测
 培养 18-24h 后，收集细胞进行流式检测抗体的内吞效果，使用PE通道检测