告别比色法的灵敏度瓶颈——UA-Glo® LDH发光法细胞毒性检测，让微量细胞毒性无所遁形

传统LDH检测大多采用比色法原理：LDH催化乳酸氧化生成丙酮酸，同时将NAD⁺还原为NADH，NADH在硫辛酰胺脱氢酶的辅助下将无色INT还原为红色的甲臜（Formazan），最后用酶标仪在490 nm处读取吸光度。

这个方法经典、可靠，但短板也十分明显。首先，比色法的灵敏度相对有限——即便使用优化后的比色体系，也只能检测到约500个坏死细胞释放的酶量。对于原代细胞、干细胞这类样本量极其珍贵的实验场景，或者高通量药物筛选平台（384孔板乃至1536孔板）中对微量细胞毒性的评估，传统比色法的灵敏度便显得有些捉襟见肘。其次，比色法每次检测需要吸取50μL以上的上清液，在需要多时间点取样的实验中，很容易导致培养孔体积不足，影响细胞生长环境。此外，比色法的线性范围也相对较窄，样本稀释不当容易超出检测范围，给实验操作带来额外负担。

UA-Glo® LDH发光法细胞毒性检测试剂盒（UA079041）的最大突破在于，它将传统比色法的终点信号从可见光吸收升级为生物发光信号，实现了量变到质变的灵敏度跃升。

（酶偶联发光体系：发光强度与LDH活性严格正比，灵敏度远超传统比色）

LDH发光法检测核心原理是一套精巧的酶偶联反应系统。样品中的LDH首先催化乳酸氧化，同时将NAD⁺还原为NADH；随后，还原酶利用生成的NADH将还原酶底物转化为荧光素（Luciferin）；最后，荧光素酶催化荧光素发光。整个反应在单一试剂体系中同时进行，发光强度与样品中的LDH活性呈严格的正比关系。

与传统比色法相比，这套“酶偶联-发光”体系带来了几个关键突破：

• 灵敏度的大幅提升：可检测到少于10个细胞的LDH释放量——这对于传统比色法来说几乎是不可想象的。
• 样品需求量小：仅需吸取2-5μL细胞培养基上清即可完成检测。
• 均质即用、操作极简： UA-Glo®采用均质即用型配方，只需一次加样即可进行检测，无需传统比色法中繁琐的转移上清、加入反应液、避光孵育等多个手工步骤，大大减少了多次加样可能引入的实验误差。
• 无需裂解细胞，无损检测：操作更加简化，检测后细胞仍可继续培养，便于与其他细胞健康状态检测试剂联合使用。
• 兼容性好：可轻松扩展至384孔板乃至1536孔板，完美适配高通量药物筛选平台，且可与细胞活力检测（如CTG试剂盒）、细胞凋亡检测（如Caspase 3/7）等试剂盒在同一个实验体系中联合使用，实现多维度的细胞健康状态评估。

• 药物研发领域：用于小分子药物、天然产物提取物、PROTAC靶向蛋白降解药物、抗体偶联药物（ADC）以及CAR-T细胞疗法等新一代治疗手段的细胞毒性（ADCC）评估和体外活性验证。
• 3D细胞培养领域：3D肿瘤球、类器官等立体培养模型在形态和生理功能上更接近体内组织微环境，是药物反应预测更为可靠的体外模型。然而，3D培养的样本量通常极为有限，传统检测方法往往难以胜任。发光法LDH检测凭借其超高灵敏度，仅需微量样品即可完成检测，使得在3D肿瘤球等立体培养模型中进行药物时间和剂量依赖性的毒性研究成为可能。
• 肿瘤微环境研究：LDH释放被认为是坏死的早期事件，与凋亡有着不同的细胞死亡机制。结合凋亡检测试剂（如Caspase 3/7试剂盒），可以帮助研究人员区分药物诱导的究竟是凋亡还是坏死，为药物的细胞死亡机制研究提供更为清晰的证据链。
• 纳米材料与医疗器械的生物相容性评价：LDH检测已被纳入相关行业标准——YY/T 0993-2015《医疗器械生物学评价 纳米材料：体外细胞毒性试验》中明确将LDH试验与MTT试验并列作为推荐检测方法。
• 化妆品、食品添加剂及环境污染物（如重金属、农药）的毒理学评价：细胞毒性检测试剂盒被广泛用于确定安全浓度范围。