精准检测PI3K激酶活性——UA-Glo®激酶ADP检测试剂盒（含底物PIP₂:3PS），助力肿瘤靶向药物研发

磷脂酰肌醇-3-激酶及其介导的PI3K/Akt/mTOR信号通路在细胞的生长、增殖、代谢、存活和免疫调控中发挥着核心调控作用。然而，该通路的过度激活已被证实与多种人类恶性肿瘤的发生发展密切相关，包括前列腺癌、乳腺癌、结直肠癌等。PI3K/Akt/mTOR信号轴的异常不仅是肿瘤恶性转化、治疗抵抗和免疫逃逸的重要驱动因素，也成为癌症靶向治疗领域备受瞩目的研究焦点。

PI3K激酶家族中研究最为广泛的是Class I型PI3K，它通过磷酸化磷脂酰肌醇二磷酸（PIP₂）生成磷脂酰肌醇三磷酸（PIP₃），从而启动下游AKT/mTOR级联信号，推动肿瘤的发生与进展。

与传统的ATP消耗检测方法不同，UA-Glo®激酶ADP检测试剂盒的核心技术优势在于直接定量检测激酶反应的产物——ADP。该试剂通过两步法实现ADP的高灵敏度定量：首先加入ATP去除试剂终止激酶反应并消耗剩余ATP，随后加入ADP检测试剂将ADP转化为ATP，并通过荧光素酶/荧光素体系产生与ADP浓度成正比的生物发光信号。研究表明，产物生成法比底物消耗法具有更高的灵敏度和动态范围，即使在较低的ATP转化率下也能获得优异的信噪比。

1. 极致的检测灵敏度与稳健性
UA-Glo®激酶ADP检测试剂可定量检测低至0.25pmol的ADP，信背比优异，即使在低酶用量和高密度板（96/384孔板）格式下也能获得可靠结果，特别适用于高通量筛选（HTS）场景。

2. 优异的底物兼容性——专为脂激酶优化
本产品的一大亮点在于已预配备了经验证的Class I PI3K特异性底物PIP₂:3PS。该底物由磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸（PIP₂）与载体磷脂磷脂酰丝氨酸（PS）按1:3比例混合制备，与Class I PI3Ks的识别偏好高度匹配。PIP₂:3PS底物的存在消除了研究人员自行配制和优化脂质底物所面临的巨大挑战——脂质底物在体内存在于独特的膜环境中，在水溶液中不溶，这一特性使其成为脂激酶检测开发中最关键的技术难点。

3. 广泛的激酶适用范围
除PI3K类脂激酶外，该试剂盒还可检测几乎所有产生ADP的酶类，包括蛋白质激酶、ATP酶、多种药物外排蛋白（如MDR1-Pgp）、解旋酶、拓扑异构酶及热休克蛋白等。激酶反应中ATP浓度最高可至1 mM，且可通过调整ATP浓度区分ATP竞争性和非竞争性抑制剂。

4. 简易的操作流程
UA-Glo®采用“加样即读”的简单工作流程——无需抗体、无需放射性标记、无需固相分离步骤，检测程序高度标准化，适合自动化操作和规模化筛选。

随着PI3K/Akt/mTOR信号通路在肿瘤生物学及精准治疗中核心地位的不断确立，开发能够克服耐药性、选择性更高且毒性更低的下一代PI3K抑制剂已成为全球药物研发的热点方向。UA-Glo®激酶ADP检测试剂盒（含PI3K底物PIP₂:3PS）以灵敏可靠、操作简便、底物预优化的一体化方案，为PI3K靶点的抑制剂筛选与机制研究提供了理想的生化检测工具，助力从靶点到药物的创新转化。