2小时超稳辉光，一骑绝尘——UA-Glo® NAD(P)H检测系统为HTS而生

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD⁺/NADH）及其磷酸化衍生物（NADP⁺/NADPH）是细胞能量代谢和氧化还原稳态不可或缺的基础辅酶。NAD⁺作为“能量货币”的调控者，驱动糖酵解、三羧酸循环以及氧化磷酸化等关键反应；而NADH和NADPH则作为电子供体，参与脂肪酸合成、抗氧化防御以及DNA修复等一系列维持细胞稳态的核心通路。研究表明，NAD⁺水平的动态变化与衰老、神经退行性疾病、癌症及代谢紊乱紧密相关。

UA-Glo® NAD(P)H Detection System（货号：UA079042），凭借均质型偶联酶发光技术，为全球科研及药物研发工作者带来了一款精准、简便、稳定且高效的高通量解决方案。

UA-Glo® NAD(P)H检测试剂的核心在于其双酶偶联反应体系。该体系包含一个高效的还原酶和一个高活性的荧光素酶。还原酶能够等效地利用样本中的NADH或NADPH作为底物，催化特定底物转化为荧光素分子；随即，荧光素在荧光素酶的催化下产生稳定且强烈的生物发光信号。

核心优势：让NAD(P)H检测从“慢工细活”进化为“标准流程”

1. 操作极致简便——True “Add and Read”均质法
传统的NAD(P)H检测往往像一场多线程的指挥交响——需要分别准备NAD⁺和NADH的抽提、中和、热灭活等多个步骤，极易引入人为误差。而UA-Glo®彻底解放了双手。作为一款均质型试剂（Homogeneous Reagent），实验流程仅需“一步加样”——将试剂直接加入含样本和待测抑制剂的孔中混合，即可进入发光检测环节，无需额外的离心、分离或纯化步骤。与其他比色法与荧光法相比，不仅显著减少了多次操作可能导致的实验误差，还极大缩短了手动操作时间。

2. 超长稳定的辉光信号——“酶抑制筛选的终局增益”
在高通量药物筛选或大规模样品分析中，信号的稳定性直接决定了数据的可靠性和通量上限。UA-Glo®检测系统输出的辉光型生物发光信号具有极其出色的稳定性，信号半衰期超过2小时。这意味着，即使对数百甚至数千个样品进行连续加样及批量检测，发光强度也能在数小时内保持高度的均一性，完全不受“边加样边衰减”的困扰。这一特性使其成为基于NAD(P)H代谢的酶抑制剂高通量筛选（HTS） 的理想搭档。

3. 高信噪比与优异的重复性
由于生物发光检测的零背景特性，UA-Glo®检测系统在灵敏度和特异性上都优于传统的比色法和荧光法。背景信号低至可忽略不计，无需复杂的校正。同时，均质化的设计和稳定的酶偶联反应保证了批次内和批次间数据的可重复性，为严格的定量分析提供了坚实保障。

不同 NAD(P)H 检测方法的对比

方法分类	检测原理	特点	主要局限性
生物发光法	还原酶 + 荧光素酶偶联反应	均相、高灵敏度、宽动态范围、无荧光干扰、信号稳定、HTS 兼容	无法区分 NADH 和 NADPH
紫外吸光度	NAD(P)H 在 340 nm 处的直接吸光	操作简单，无需试剂	灵敏度低（需 μmol/L 级），背景代谢物干扰严重
自发荧光检测	NAD(P)H 在 340 nm 激发、460 nm 发射的天然荧光	可用于活细胞实时成像	NADH 与 NADPH 光谱相同，无法区分；受组织和培养基自体荧光干扰
基于 MTT/PES 的酶循环比色法	NAD(P)H 经循环氧化还原放大信号，产生有色/荧光产物	灵敏度优于直接光学法	非均相，步骤繁琐，批间变异较大
LC-MS / LC-MS/MS	基于质量和离子化效率的直接检测	高分辨率，可区分 NAD⁺ 和 NADH，灵敏度可达 nmol 级	设备昂贵，样品处理复杂，通量低

应用场景解析：助力前沿科学研究

1. 酶抑制剂的高通量筛选
对于代谢酶（如脱氢酶、还原酶）、激酶或任何依赖NAD(P)H作为底物或辅因子的酶靶点，进行抑制剂筛选是药物发现中最常规且最重要的环节之一。

2. 细胞能量代谢状态评估
通过测定不同处理条件下（如药物处理、基因敲除、代谢应激等）细胞内NAD(P)H水平的变化，研究人员能够直观地量化细胞的还原力水平和氧化应激状态。这一指标为肿瘤代谢重编程、线粒体功能紊乱、炎症通路活化等机制研究提供了关键的表型证据。

3. 通用酶活测定体系
NAD(P)H是数百种氧化还原酶反应的直接产物或反应物。UA-Glo®通过偶联放大策略，可将任何涉及NAD(P)H生成或消耗的酶反应转化为高灵敏的发光信号输出，是一种高度通用的“酶活报告工具”。

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