在细胞药理筛选、肿瘤增殖探究与体外细胞毒性评价等生物实验中，活细胞精准计数是数据可靠的核心前提。传统 MTT、CCK-8 等代谢依赖型检测试剂易受细胞代谢波动、药物干扰影响，数值偏差频发；基于核酸染色的常规试剂盒常受胞外游离 DNA 干扰，非特异性荧光拉高背景值，制约高通量筛选落地。优爱生物自研CyQuantiFluor™细胞活力检测试剂盒依托双染料协同屏蔽技术，跳出代谢依赖局限，凭借均质化操作优势，成为细胞增殖、细胞毒性及小分子药物高通量筛选的优选工具。

试剂盒核心由DNA 特异性结合染料 + 背景屏蔽染料复配而成，两种染料分工实现活细胞专一标记。DNA 结合染料游离状态下荧光本底极低，可穿透完整活细胞膜，靶向结合细胞核 DNA 后荧光显著增强，荧光信号强弱与胞内 DNA 含量呈线性相关，依托该关联即可定量活细胞数目。配套的背景屏蔽染料无法穿透完整活细胞膜，能淬灭死细胞裂解释放游离 DNA、体系杂质 DNA 与染色剂结合产生的杂荧光，从源头剔除死细胞干扰信号，最终仪器捕获荧光仅源自存活细胞核酸结合产物，大幅提升检测特异性。区别于依托胞内脱氢酶活性的显色试剂，CyQuantiFluor™直接定量活细胞基因组 DNA 含量，检测结果不受细胞营养状态、药物代谢抑制作用干扰，活细胞计数精准度显著优于传统酶促显色体系。

产品采用全均质配方，实现一步加样检测，无需换液、洗涤、终止反应等繁琐步骤。实验仅需等体积添加 2× 工作液与细胞培养液，精简多步操作带来的移液误差，适配 96 孔、384 孔微孔板高通量筛选场景。试剂兼具高信噪比、批间重复性优、溶液理化稳定性突出等特性，广泛适配各类贴壁、悬浮细胞模型，既适用于常规细胞增殖动力学试验、外源化合物细胞毒性评估，在抗肿瘤候选药物高通量初筛、肿瘤细胞增殖抑制活性筛选场景中优势尤为突出。

选用底透黑壁 96 孔培养板，每孔铺种 100 μL 适宜浓度待测细胞；

按试验设计给药处理细胞，增殖 / 毒性模型分别添加受试化合物，恒温孵育造模；

工作液配制：以 PBS、HBSS 或细胞完全培养基为基质，按比例添加 250×DNA 结合染料与 50× 背景屏蔽染料配制成 2× 检测液；以 12 mL 体系为例，11.7 mL HBSS 中添加 48 μL 核酸染料、240 μL 屏蔽染料，充分震荡混匀；

每孔 100 μL 细胞液对等加入 100 μL 2× 检测试剂，严格维持细胞悬液与试剂体积 1:1 配比；

置于 37℃、5% CO₂培养箱避光孵育 1～6 h，可延长孵育提升灵敏度，最优孵育时长经预实验确定；悬浮细胞检测前低速离心，使细胞沉降至孔底；

酶标仪底部荧光读数，选用 FITC 通道（激发 490 nm、发射 520 nm）采集荧光数值。

受细胞类型、药物理化性质影响，不同批次微孔板荧光绝对读值不具备横向对比意义。实验需同步设置溶剂空白对照组与阳性毒性对照孔，全部样本荧光数据依托对照组进行归一化换算后，再开展细胞存活率、增殖抑制率统计分析，保障组间数据可比性。

从基础细胞科研到药企高通量化合物筛选，CyQuantiFluor™凭借高特异、易操作、抗干扰的产品属性，有效弥补传统细胞活力检测短板，为体外细胞药理研究提供稳定可靠的核酸定量解决方案。