体外破骨细胞 10 天速成方案:M-CSF 30 ng/mL + RANKL 50 ng/mL,TRAP⁺多核≥90%,骨吸收坑面积>70%

UA-M-CSF 30 ng/mL + UA-RANKL 50 ng/mL 诱导 10 天,TRAP⁺多核破骨细胞≥90%,骨吸收坑面积>70%,适用于骨质疏松药效与基因功能研究。

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最新进展

体外破骨细胞 10 天速成方案:M-CSF 30 ng/mL + RANKL 50 ng/mL,TRAP⁺多核≥90%,骨吸收坑面积>70%

 

一句话结论

 

用 UA-M-CSF(30 ng/mL)与 UA-RANKL(50 ng/mL)连续诱导 CD14⁺单核细胞 10 天,即可获得 TRAP⁺多核破骨细胞≥90%,骨吸收坑面积>70%,满足骨质疏松药效评价与基因功能研究需求。

 

破骨细胞分化“双信号”模型

 

M-CSF:存活+增殖+上调 RANK 受体(UA040016)。

 

RANKL:融合+骨吸收功能开关(UA040336)。

 

缺一则分化失败,浓度不足则多核率<30%。

 

4 步标准流程

 

步骤

关键参数

UA 货号

操作要点

① PBMC 分离

Ficoll 密度梯度

纯度>85%

② CD14⁺分选

磁珠阳性筛选

纯度≥95%

③ 诱导启动

D0 加 M-CSF 30 ng/mL

UA040016

48 h 内细胞贴壁率>95%

④ 持续诱导

D3/6/9 换液补 RANKL 50 ng/mL

UA040336

10 d 出现≥3 核巨细胞

 

质控金标准

 

TRAP 染色:阳性率≥90%(紫红胞浆+多核)。

 

骨吸收板:坑面积≥70%,坑深≥3 μm(扫描电镜)。

 

基因标志:CTSK、NFATc1、DC-STAMP 表达上调>20 倍(qPCR)。

 

优爱蛋白细胞因子 3 大优势

 

高活性:RANKL EC₅₀≤2 ng/mL,比进口品牌高 1.5 倍。

 

低内毒:<0.05 EU/μg,可直接用于高通量药物筛选。

 

批次稳:连续 20 批 CV<5%,保证长期实验可重复。

 

5 大应用场景

 

骨质疏松新药骨吸收抑制率 IC₅₀测定

 

RANK/RANKL/OPG 信号通路基因编辑功能验证

 

牙周炎骨破坏机制研究

 

肿瘤骨转移溶骨模型构建

 

免疫细胞-破骨细胞互作共培养

 

即用清单(货号+规格)

 

产品

货号

规格

保存

重组人 M-CSF

UA040016

100 μg/1 mg

-80 ℃

重组人 RANKL

UA040336

50 μg/500 μg

-80 ℃

 

 

优爱蛋白(UA Bio),重组蛋白专家

优爱蛋白专注于提供药物研发、细胞治疗、基因治疗、基础科研所需各种蛋白类试剂原材料和服务,包括药物靶点蛋白、免疫检查点蛋白、细胞因子、工具酶、 蛋白定制表达、全长跨膜蛋白开发等。优爱致力于为客户提供优质的产品和专业服务,打造具有国际竞争力的高新技术企业。

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