THP-1极化实操：从M0到M1/M2，手把手教你避坑！

1.背景介绍

 

在免疫学、炎症机制研究及药物筛选中，巨噬细胞的功能状态是研究热点之一。人THP-1细胞系因其来源稳定、遗传背景一致，被广泛应用于单核-巨噬细胞极化的体外研究。然而，如何高效、稳定地将THP-1诱导为M1型（经典活化）或M2型（替代活化）巨噬细胞，仍是实验成功的关键。

 

DOI:10.3390/biomedicines11020608

 

 

2.优爱新品推荐

 

优爱生物（UA BIOSCIENCE）全新推出的人 THP-1 细胞极化诱导试剂盒（货号 UA090040），为巨噬细胞功能研究提供了一站式、高稳定性的体外模型构建方案。该试剂盒包含经严格活性验证的细胞因子组合与详细操作指南，帮助研究人员轻松实现THP-1单核细胞向M1或M2型巨噬细胞的定向极化。

 

为什么选择优爱的THP-1极化方案？

 

✅ 高效稳定

专为THP-1细胞优化，M1/M2极化诱导效率高，批次间重复性好。

 

✅ 操作便捷

标准化流程，减少实验摸索，快速构建炎症、肿瘤、代谢等疾病研究模型。

 

✅ 应用广泛

支持免疫调控机制、抗炎药物筛选、肿瘤微环境等研究场景。

 

 

3.实验方案

 

人 THP-1 细胞极化诱导试剂盒（ 货号UA090040）实验方案：

 

极化前准备：

用于诱导极化的细胞代数不宜过高，诱导极化前使用流式细胞术检测THP-1细胞的CD14和CD11b表达，两者不表达或低表达的THP-1细胞才可用于后续实验。

 

 

M1/M2诱导

 

1.M1诱导：

用M0诱导培养基（1640完全培养基，含100 ng/mL PMA），将THP-1（状态良好，活率>95%，<20代）以 5×10⁵ cells/mL 密度接种于10 cm 培养皿（10 mL），培养24h，构建为巨噬细胞M0（细胞贴壁，伪足延伸）。预温PBS轻柔洗涤1-2次，去除PMA。更换为M1诱导培养基（1640完全培养基，含100 ng/mL LPS、20 ng/mL IFN-γ），培养48h。

 

阴性对照：用M0诱导培养基（1640完全培养基，含100 ng/mL PMA），将THP-1（状态良好，活率>95%，<20代）以 5×10⁵ cells/mL 密度接种于10 cm 培养皿（10 mL），培养24h，构建为巨噬细胞M0（细胞贴壁，伪足延伸）。预温PBS轻柔洗涤1-2次，去除PMA。更换为完全培养基，培养48h。建议用Accutase收样送检。

 

2.M2诱导：

用M0诱导培养基（1640完全培养基，含100 ng/mL PMA），将THP-1（状态良好，活率>95%，<20代）以 5×10⁵ cells/mL 密度接种于10 cm 培养皿（10 mL），培养24h，构建为巨噬细胞M0（细胞贴壁，伪足延伸）。预温PBS轻柔洗涤1-2次，去除PMA，更换为完全培养基，静息24h。然后更换为M2诱导培养基（1640完全培养基，含20 ng/mL IL-4、20 ng/mL IL-13），培养24h。

 

阴性对照：用M0诱导培养基（1640完全培养基，含100 ng/mL PMA），将THP-1（状态良好，活率>95%，<20代）以 5×10⁵ cells/mL 密度接种于10 cm 培养皿（10 mL），培养24h，构建为巨噬细胞M0（细胞贴壁，伪足延伸）。预温PBS轻柔洗涤1-2次，去除PMA，更换为完全培养基，静息24h。建议用Accutase收样送检。

 

 

4.应用场景

• 炎症与自身免疫病：模拟M1介导的炎症反应，用于抗炎药物筛选及炎症小体机制研究。
• 肿瘤免疫：构建M2型肿瘤相关巨噬细胞模型，研究免疫逃逸机制及重极化药物。
• 感染免疫：建立病原体-巨噬细胞互作模型，评估杀伤功能与免疫逃逸策略。
• 药物筛选：以M1/M2标志物为指标，定量评价候选化合物的免疫调节活性。
• 组织修复：模拟M2介导的组织重塑过程，评估促愈合材料及纤维化机制研究。