UA-Glo® Nano-luc Live Cell Assay System

反应缓冲液及底物分别混灌装于10 ml 或100 ml的棕色瓶及2ml的螺旋管中，规格如下：

1. 在96孔或384孔细胞培养板铺合适密度的待检测细胞，待检测细胞可以是表达带有分裂荧光素酶大小片段标签的目标蛋白的瞬转细胞，稳定细胞株或内源性表达细胞系。建议使用白板。

2. 根据项目需求对细胞进行相关处理，并继续培养合适的时间。

3. 取出检测缓冲液，平衡至室温。离心底物管10秒钟，将内容物收集于管底，放置在冰盒上。

4. 取出待测细胞培养板，平衡至室温。

5. 准备检测试剂：建议加50 µl 的检测试剂到 96孔板细胞中, 或10 µl 试剂到384 孔板细胞中。根据实验需求确定配制的试剂量。配制时将底物加到检测缓冲液中，充分混匀。试剂盒中底物是200x，使用前用缓冲液稀释成1x的检测工作液。注意避光。

6. 吸去检测孔细胞培养液，加入50 µl 的1x检测工作液到每个96孔板检测孔中,或10 µl 试剂到每个384 孔板检测孔中，轻轻振荡15秒钟。如果是悬浮细胞，需要将反应板离心后，小心吸去培养液，然后再加入1x检测工作液。

7. 在荧光读板仪上读取荧光信号。保存数据，进行数据处理分析。

1. 试剂量：非经严格验证，不建议随意改变反应试剂用量。

2. 不同批次的试剂不建议混合使用。

3. 分装储存：按照说明书分装储存反应试剂，保证试剂的稳定性。