Tissue Digestion Kit II

小鼠肠道组织的消化，仅供参考：

• 消化液配制：0.5ml重组胶原酶混合组分+1.5ml耐热金属蛋白酶，加4.0ml DMEM培养基稀释，并加FBS至终浓度3%，DNase I
• 至终浓度100U/ml，青链双抗至终浓度0.1%；
• 将小肠从组织保存液中取出，转移至10cm皿中，加入10ml预冷的PBS+1%青链双抗，涮洗2-3次；
• 将涮洗后的小肠转移至新的装有10ml预冷的PBS+1%青链双抗的10cm皿中，用注射器前后冲洗3次，将小肠内容物去除干净；
• 将冲洗干净后的小肠转移至新的装有10ml预冷的PBS+1%青链双抗的10cm皿中，用剪刀将小肠纵向剖开，用镊子将小肠表面绒
• 毛等轻轻刮去；
• 将小肠转移至新的装有10ml预冷的PBS+1%青链双抗的10cm皿中，将小肠剪成1cm长小段，转移至2ml EP管中，用剪刀适当
• 剪碎；
• 将剪碎后小肠转移至15ml离心管中，加入6ml 消化液，37℃水浴10min，中间5min时取出颠倒混匀静置片刻，取上清至50ml离心管中，补DMEM完培至20ml；
• 沉淀中加入5ml DMEM+3% FBS 吹打数次，静置片刻，取上清与上一步的溶液合并；
• 340g 4℃离心8min，弃上清后，用12.5ml PBS重悬过70µm细胞筛，往过筛后细胞中加入8ml DMEM完全培养基。
  

This product should avoid repeated freezing and thawing. If there is any surplus, it is recommended to store it at -20℃