UA-Glo® Caspase 3/7 Assay
Caspase3/7细胞凋亡检测试剂盒
- 价格: ¥490
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- 操作详情
产品组分
荧光素酶,多肽荧光素偶联底物,缓冲液混合后灌装于 10 ml 或 100 ml 的棕色瓶中,规格如下:
规格
可检测的 96-孔板孔数
可检测的 384-孔板孔数
2.5 ml
50 wells
250 wells
10 ml
200 wells
1000 wells
100 ml
2,000 wells
10,000 wells
10X10 ml
2,000 wells
10,000 wells
操作步骤
1. 细胞准备
1) 在 96 孔或 384 孔白色细胞培养板铺合适密度的细胞。
2) 根据实验设定,细胞孵育一定时间后将合适浓度的待检测化合物加到细胞板孔中。建议设置只加溶剂载体的细胞对照(阴性对照)和只加溶剂载体的细胞培养基对照(空白对照)(说明详见注意事项 4)。
3) 根据实验需求继续培养合适的时间诱导细胞凋亡。
2. Caspases 3/7 细胞凋亡检测
1) 取出Caspases 3/7 细胞凋亡检测试剂,在室温平衡 20 分钟。轻摇混匀。
2) 取出待测细胞培养板,在室温平衡 20 分钟。
3) 加 50 µl 的检测试剂到 100 µl 96 孔板细胞中, 或 10 µl 试剂到 20 µl 384 孔板细胞中,振板 2 分钟,放置暗处室温孵育 30-60min 。荧光信号一般在加入检测试剂 1hr 左右达到最大值。最早可以在加入检测试剂后 30min 读板, 最晚不要超过 3hr。
4) 在luminescence 读板仪上读取荧光信号 。注意事项
1. 按照说明书分装储存反应试剂,保证试剂的稳定性。
2. 非经严格验证,不建议随意改变反应试剂用量。
3. 荧光素酶反应对温度变化敏感。试剂和测试样品需要平衡到室温(22℃-26℃),测试过程温度保持恒定(±1℃)。
4. 空白对照是对细胞培养系统和Caspase 3/7 检测试剂相关的背景荧光的测量,可以选择从检测值中减去空白对照后再进行相应的计算。细胞阴性对照反映了待测细胞的基础Caspase 3/7 活性,可作为实验结果解释的参考。
5. 本产品仅作科研用途。
- 产品数据
生物活性
Caspases3/7细胞凋亡检测试剂检测化合物Staurosporine(STSP)对HeLa细胞凋亡的作用:4x105/ml 的HeLa细胞接种于96孔白板透明底培养板,100µl/孔。24小时后加入3倍稀释的STSP,37℃5%CO2孵育6hr后按照Caspases3/7细胞凋亡检测试剂的说明进行Caspases3/7活性检测。图1示加入检测试剂后30min-130min读取荧光值的剂量曲线,表格为计算所得的EC50值。
Caspases3/7细胞凋亡检测灵敏度测试:1μMSTSP处理HeLa细胞6hr后,两倍系列稀释的STSP处理的HeLa细胞接种于96孔透明底白板,100µl/孔;细胞浓度为25,000-180cell/well。按照Caspases3/7 细胞凋亡检测试剂的说明进行Caspases3/7活性检测。左图示在检测的40min-70min,荧光信号和细胞凋亡数成线性相关(R2>0.99),可以检测低至200个凋亡细胞。右图示1μMSTSP和溶剂DMSO处理HeLa细胞6hr后进行Caspases3/7活性检测(70min荧光检测数值)。
| 货号 | 产品名称 | 种属 | 表达系统 | 数量 |
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