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重组人纤维连接蛋白(Recombinant human fibronectin)是一种多功能的细胞外基质蛋白,也是一种高分子量的糖蛋白,它可以结合细胞表面和细胞外基质中的多种组分,包括胶原蛋白、纤维蛋白、肝素、DNA 和肌动蛋白等。
重组人纤维连接蛋白的结构
重组人纤维连接蛋白片段,由 574 个氨基酸构建而成,分子量约为 63kDa。它主要包含三个功能区,各有独特使命。C-Domain 作为细胞粘附区域,拥有关键的 RGD 序列,能精准地与细胞表面的受体结合,在细胞间的相互作用中发挥核心作用;H-Domain 则为病毒粘附提供场所,在病毒相关研究和应用中有着不可忽视的价值;CS-1 位点同样肩负细胞粘附的重任,与 C-Domain 相互配合,稳固细胞间的连接。
基因治疗与细胞工程
在基因治疗和细胞工程领域,重组人纤维连接蛋白堪称提升转染效率的 “神奇魔法棒”。细胞表面的 VLA-4 和 VLA-5 ,分别与纤维连接蛋白上的 CS-1 位点及 C-Domain 紧密结合,而逆转录病毒载体则 “停靠” 在 H-Domain 上。当培养容器表面被纤维连接蛋白包被后,细胞与病毒载体以高浓度聚集共存,使得病毒的转染效率大幅提升,能达到 30 - 70%,为基因治疗和细胞改造提供了强大助力。例如在一些罕见病的基因治疗研究中,借助纤维连接蛋白提高转染效率,让携带治疗基因的病毒更有效地进入细胞,为攻克疑难病症带来希望。
细胞培养
细胞的黏连与增殖是生命活动的基础,重组人纤维连接蛋白在这方面表现卓越。当它作为细胞培养的基质时,能让多种细胞的贴壁率飙升至 90% 以上,而对照组仅为 10%。在这 里,细胞形态结构良好,代谢活力十足,DNA、RNA 及蛋白质合成速度提高约 5 倍,细胞集落率升高几倍,原代培养的成活率显著提高,生长时间也大大缩短。不仅如此,它还能刺激细胞实现上千倍的增殖。它与抗 CD3 抗体携手,分别与 T 淋巴细胞上的 VLA 和 TCR 结合,激活酪氨酸激酶 pp125FAK,通过 Ras 途径激发 T 细胞的增殖和分化,为免疫细胞的研究和应用注入新活力。在肿瘤免疫治疗中,利用纤维连接蛋白促进 T 细胞增殖,增强免疫细胞对肿瘤细胞的攻击力,为癌症治疗开辟新途径。
科研领域
此外,重组人纤维连接蛋白在科研领域它能提高细胞的融合率,缩短融合周期,在细胞杂交瘤技术中发挥关键作用,帮助科研人员更高效地制备单克隆抗体。将其涂覆到微球载体上,就成为了细胞大量生产的优质介质,不仅节省空间和原材料,还为利用培养细胞技术生产新药品奠定了坚实基础,推动生物制药产业不断向前发展。
随着研究的不断深入,重组人纤维连接蛋白的潜在价值还在不断被挖掘。