高效扩增高活性CIK细胞：细胞因子在肿瘤过继免疫治疗中的核心作用

高效扩增高活性CIK细胞：细胞因子在肿瘤过继免疫治疗中的核心作用

 

细胞因子诱导的杀伤细胞在肿瘤过继免疫治疗中展现出广阔的应用前景。作为一种非MHC限制性的高效杀伤细胞，CIK细胞能够有效识别并清除多种肿瘤细胞，且副作用小。要获得数量充足、杀伤力强的CIK细胞，一套稳定可靠的培养方案与高品质的细胞因子至关重要。

 

本文将详细解析人CIK细胞的标准培养流程，并重点阐述如何通过选择优爱生物（UA BIOSCIENCE ）的高纯度、高活性细胞因子，为CIK细胞的成功扩增与高效激活提供坚实保障。

 

CIK细胞：肿瘤免疫治疗的“精锐部队”

 

CIK细胞是一群异质性的细胞，其主要效应细胞表面同时表达CD3和CD56分子，因此兼具T淋巴细胞强大的抗肿瘤活性和NK细胞的非MHC限制性杀伤能力。它们能够通过多种机制杀伤肿瘤细胞，对多种血液肿瘤和实体瘤均显示出良好的治疗效果。

 

CIK细胞培养方案详解：三步激活法

 

一个成功的CIK细胞培养周期通常为14天，其核心在于通过细胞因子的时序性添加，精准调控细胞的活化和增殖。

 

第一步：外周血单个核细胞的采集与制备

 

通过血细胞分离机采集患者外周血单个核细胞。

 

使用淋巴细胞分离液进行密度梯度离心，进一步纯化PBMC。

 

用无血清培养液洗涤2次，最终获得纯度高于90%的PBMC，作为CIK细胞的“种子细胞”。

 

第二步：CIK细胞的阶梯式诱导与扩增

 

启动阶段（Day 0）：将PBMC重悬于无血清培养液中，并加入关键启动因子——1000 U/mL的重组人IFN-γ。IFN-γ在此阶段的预刺激，为后续CIK细胞的高效诱导奠定了至关重要的基础。

 

激活与增殖阶段（Day 1）：

 

24小时后，加入50 ng/mL的CD3单克隆抗体和300 U/mL的重组人IL-2。CD3抗体提供T细胞激活的关键信号，而IL-2则是驱动T细胞大量增殖的核心细胞因子。

 

（可选增强步骤）：此时可同时加入100 U/mL的重组人IL-1α。IL-1α可作为协同刺激因子，进一步促进CIK细胞的活化和增殖， potentially 提高最终产物的细胞数量和杀伤活性。

 

维持与扩增阶段（Day 1 - Day 14）：

 

每3天进行半量换液或扩瓶，并补充300 U/mL的重组人IL-2，以维持细胞持续增殖所需的细胞因子浓度。

 

在培养的第14天，即可收获数量庞大、杀伤活性强的CIK细胞。

 

第三步：CIK细胞的质控与鉴定

收获的CIK细胞需经过严格质检，确保其安全性与有效性：

 

活力检测：台盼蓝染色显示活细胞率应 >80%。

 

表型鉴定：流式细胞术检测，关键的CD3+CD56+ 双阳性细胞比例应 >20%。此群体是CIK细胞中杀伤能力最强的效应细胞。

 

功能鉴定：通过乳酸脱氢酶释放法检测其对肿瘤细胞的体外杀伤率。

 

无菌与内毒素检测：确保细胞制品无细菌、真菌、支原体污染，且内毒素 <5 EU。

 

为何UA BIOSCIENCE细胞因子是CIK培养成功的基石？

 

CIK细胞的培养高度依赖于细胞因子的质量。UA BIOSCIENCE 提供的系列重组人细胞因子，以其卓越的性能，确保了CIK细胞培养过程的可重复性与终产品的优质高效。

 

UA细胞因子在CIK培养方案中的核心价值：

 

高生物活性，确保启动效率：重组人IFN-γ 的高比活性是Day 0成功启动细胞、为后续诱导铺平道路的关键。低活性的IFN-γ会导致启动不足，严重影响后期CIK细胞的扩增效率和表型形成。

 

驱动持续增殖，保障细胞数量：重组人IL-2 是CIK细胞在整个培养周期中的“能量源”。UA的IL-2纯度髙、稳定性好，能持续有效地通过自分泌和旁分泌途径促进CIK细胞分裂增殖，是获得高细胞数量的根本保证。

 

协同增强，优化细胞质量：重组人IL-1α 作为可选的增强因子，能够与IFN-γ和IL-2产生协同效应，进一步活化细胞，可能有助于提升最终产物中CD3+CD56+效应细胞的比例和整体杀伤功能。

 

严格的质控标准，确保临床应用安全：对于旨在用于临床研究的CIK细胞培养，细胞因子的纯度、无菌性和低内毒素水平至关重要。UA BIOSCIENCE的产品经过严格质量控制，最大程度降低了外源因子污染的风险，为制备符合安全标准的细胞制品提供了有力支持。

 

推荐用于CIK细胞培养的UA核心细胞因子：

 

UA040007E - IFN-γ Protein, Human：CIK细胞诱导的“启动开关”。

 

UA040108 - IL-2 Protein, Human：CIK细胞增殖的“核心引擎”。

 

UA040204 - IL-1α Protein, Human：CIK细胞活化的“强力助推器”。

 

结语

稳定、高效的CIK细胞培养体系，是开展相关肿瘤免疫治疗研究与应用的前提。选择高品质的细胞因子，是构建这一体系的重中之重。UA BIOSCIENCE，凭借其高质量、高活性的细胞因子产品，为您提供从研究到临床前开发的全程可靠支持。