一键解锁MO-DC高效诱导方案

在肿瘤免疫、疫苗研发和自身免疫性疾病研究中，树突状细胞（DC）作为"免疫指挥官"的重要性不言而喻。然而，传统DC细胞诱导分化实验往往面临试剂配比繁琐、批次差异大、分化效率不稳定等痛点，让无数科研工作者耗费宝贵时间却难以获得理想结果。

优爱生物（UA BIOSCIENCE）全新推出的人MO-DC单核诱导分化细胞因子套装，是省时、省力、省心的"一站式"解决方案，将DC诱导所需核心因子完美整合，助您轻松获得成熟树突状细胞。

 

为何选择我们的产品？

科学验证：经过严格的功能验证，确保诱导的DC细胞表型和功能符合标准

操作简便：提供详细的操作协议和技术支持，即使初入该领域的研究人员也能快速上手

性价比高：相较于购买商业化DC细胞或自行优化配方，我们的套装大幅降低了研究成本和时间投入

 

人MO-DC单核诱导分化树突状细胞因子套装（货号：UA090052）实验方案：

人外周血单核细胞来源树突状细胞的制备：

1、CD14⁺单核细胞分选

1.1复苏冻存的PBMC，室温300g离心5min。弃去上清，使用完全培养基RPMI 1640（含10% FBS和1%双抗）重悬细胞，并进行细胞计数与活率检测（活率应大于95%）；加入CD14阳性分选磁珠（CD14 Nanobeads, human，货号S0K0004）对细胞进行标记、分离并收集CD14⁺细胞。取少量分选后的细胞，使用流式细胞术检测CD14⁺细胞纯度纯度，为确保后续实验质量，建议纯度应大于95%；

 

2、单核细胞诱导为未成熟树突状细胞

2.1用完全培养基RPMI 1640（含10% FBS和1%双抗）将分选后的CD14+ 细胞浓度调整至1-2×106 cells/mL。按每孔1mL接种于24孔板中，并立即加入重组人细胞因子IL-4（50ng/mL）和GM-CSF（100ng/mL），将24孔板置于37℃、5% CO2的培养箱中开始培养；

2.2 培养48h后，在显微镜下观察细胞状态。若细胞贴壁良好：轻柔吸弃一半旧培养基，再缓慢加入等体积、含有相同浓度IL-4和GM-CSF的新鲜完全培养基；若细胞贴壁不佳或大量悬浮：无需弃去旧液，直接补加适量含有相同浓度细胞因子的新鲜完全培养基。

继续培养：完成换液/补液后，将细胞继续培养72小时。结束后即可获得未成熟树突状细胞。

 

3、未成熟树突状细胞诱导为成熟树突状细胞

3.1 轻柔吹打收集step2的未成熟树突状细胞，300g离心10分钟。弃去上清。用新鲜完全培养基重悬细胞，并将密度调整至5 × 10⁵ cells/mL。将细胞悬液接种至新的24孔板中，并加入成熟诱导因子混合物：TNF-α（10 ng/mL）、IL-1β（10 ng/mL）、IL-6（50 ng/mL）和PGE2（1 μg/mL）。将细胞置于37°C、5% CO₂培养箱中继续培养48小时。培养结束后，即可获得成熟的树突状细胞，用于后续实验。

 

流式细胞术检测

1. 细胞收集：经细胞因子处理后，收集细胞。

2. 细胞计数：用细胞计数仪计数，并计算细胞总数，300 × g离心5分钟，弃上清，用细胞染色缓冲液（10% FBS或1% BSA PBS）重悬细胞至5-10 × 106 cells/mL。

3. Fc受体阻断：在冰上用100 μL悬浮液（含5-10 × 105个）和1 μL Human FcR Blocking Reagent (human antibodies against CD16/32/64) (STARTER CAT: S0F0012），孵育细胞30分钟，300g离心5分钟，弃上清。

 

4. 抗体孵育：用100 μl 10% FBS的PBS（或含1% BSA）重悬细胞。分别加入以下抗体：

APC Rabbit Anti-Human CD80 Antibody (Starter)

APC Rabbit Anti-Human CD86 Antibody (Starter CAT: S0B1658)

Anti-Hu CD83 APC

Brilliant Violet 711™ anti-human CD11c Antibody

Brilliant Violet 421™ anti-human CD14 Antibody

Alexa Fluor® 488 anti-human HLA-DR Antibody

4℃孵育30分钟，300g离心5分钟，弃上清。

 

5. 洗涤细胞：用PBS洗涤细胞，去除残留的抗体，并再次用PBS重悬。

6. 死活染料染色：每孔加入7-AAD，室温避光孵育5min。

7. 上机检测。

 

验证数据：

（此处为图片描述，实际网站中可替换为img标签）

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应用领域广泛，赋能前沿研究

肿瘤免疫治疗：制备负载肿瘤抗原的DC细胞，用于DC疫苗研发与评估

感染免疫研究：研究DC细胞在病原体感染过程中的应答机制

自身免疫疾病：探索DC在自身免疫疾病发生发展中的调控作用

药物筛选平台：建立基于DC细胞的免疫调节药物筛选模型

免疫机制研究：深入解析DC细胞成熟、迁移及T细胞激活的分子机制

 

其他细胞因子套装：

货号	品名	包含
UA090033	人T细胞激活试剂盒	Protein：IL-2 mAb：CD3、CD28
UA090016	人Th1极化套装	Protein：IL-2、IL-12 mAb：CD3、CD28、IL-4、IFN-γ β-巯基乙醇
UA090018	人Th2极化套装	Protein：IL-2、IL-4 mAb：CD3、CD28、IL-4、IFN-γ β-巯基乙醇
UA090019	人Th17极化套装	Protein：IL-6、IL-23、TGF-β1、IL-1β mAb：CD3、CD28、IL-4、IFN-γ β-巯基乙醇
UA090032	小鼠T细胞激活试剂盒	Protein：IL-2 mAb：CD3、CD28
UA090017	小鼠Th1极化套装	Protein：IL-2、IL-12 mAb：CD3、CD28、IL-4、IFN-γ β-巯基乙醇
UA090020	小鼠Th17极化套装	Protein：IL-6、TGF-β1、IL-23、IL-1β mAb：CD3、CD28、IL-4、IFN-γ、IL-2 β-巯基乙醇
UA090022	小鼠Treg极化套装	Protein：TGF-β1 mAb：CD3、CD28、IL-4、IFN-γ β-巯基乙醇
UA090024	小鼠Tfh 极化套装	Protein：IL-6、TGF-β1、IL-21 mAb：CD3、CD28、IL-4、IFN-γ、IL-2 β-巯基乙醇
UA090012	人B细胞极化细胞因子套装	Protein：IL-2、IL-10、IL-21
UA090038	小鼠RAW264.7细胞极化套装	Protein：IL-4 、IFN-γ Lipopolysaccharide (LPS)
UA090008	小鼠BMDC诱导分化细胞因子套装	Protein：GM-CSF、IL-4、TNF-α
UA090052	人MO-DC单核诱导分化树突状细胞因子套装	Protein：IL-4、GM-CSF、TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE2
UA090040	Human THP-1 Cell Polarization Induction Kit	Protein：IL-4 、IL-13、IFN-γ Lipopolysaccharide (LPS)
UA090048	小鼠Th2极化套装	即将上线
UA090023	人Tfh极化套装	即将上线
UA090021	人Treg极化套装	即将上线